侵蚀艾肯菌致胸腔脓肿一例

作者 | 邓世霞单位 | 甘肃省酒泉市第二人民医院检验科01前   言侵蚀艾肯菌是一种革兰阴性兼性厌氧菌，是人类黏膜表面正常菌群之一，存在于呼吸道、胃肠道或泌尿生殖道，通常不致病。但当机体免疫力低下或黏膜表面破损时，可侵入周围组织引起感染[1]。国内外有文献报道侵蚀艾肯菌被可引起心内膜炎、腹腔内感染、血流感染、关节炎、胸腔脓肿、脑脓肿、肝脓肿和泌尿生殖系统感染及皮肤软组织感染等，由于侵蚀艾肯菌较难分离鉴定，本文分享此菌致胸腔脓肿感染一例并文献复习。02案例经过患者：男性，65岁。既往有“慢性支气管炎”病史20余年,否认“高血压”、“糖尿病”史，否认“肝炎”、“结核”、“伤寒”等传染病史。因“间断咳嗽、咳痰20余年，加重伴气喘5小时”于2022年10月10日入院。入院查体:体温:36.7℃脉搏:125次/分
呼吸:22次/分
血压:125/86mmLg发育正常，营养中等，体形适中，轮椅推入病房，神志清，精神差，语言流畅，问答切道，自动体位，查体合作。口唇略发绀，叩诊双肺呈过清音，听诊双肺呼吸音低，可闻及大量喘鸣音及痰鸣音，以左肺为著。心率:125次/分，律齐。入院诊断:1.慢性阻塞性肺疾病急性加重 2.胸膜炎 3.左肺下叶肺脓肿。检查结果血常规：白细胞数目12.05×109/L，
中性粒细胞百分比93.7%，血红蛋白148g/L，血小板183×109/L，见图1。图1 患者10月11日血常规炎症标志物C反应蛋白196.98mg/L，红细胞降沉速率16.0mm/h，降钙素原1.57ng/mL，见图2-3。图2 患者10月11日C反应蛋白图3 患者10月11日降钙素原生化：钾3.31mmol/L，钠136.0mmol/L，氯96.0mmol/L，葡萄糖10.63mmol/L.肝功、肾功、血脂、心肌酶均正常，见图4。图4 患者10月11日生化检验2022-10-17复查血常规+全程C反应蛋白:白细胞数目20.19×109/L，中性粒细胞百分比91.4%，C反应蛋白196.04mg/L
L，红细胞降沉速率62.0mm/h，见图5。图5 患者10月17日血常规影像学检查胸部CT示:左肺下叶肺脓肿形成，随诊复查;左侧包裹性胸腔积液、右侧胸膜肥厚粘连。诊疗经过入院后患者诉左侧胸壁疼痛，以咳嗽或活动时加重，痰量少，呈黄色黏痰，不易咳出，感气喘气短，夜间不能平卧，听诊双肺呼吸音低，可闻及大量喘鸣音及痰鸣音，以左肺为著。暂给予抗感染、平喘、化痰、改善肺功能等对症及支持治疗，抗菌药物使用左氧氟沙星联合头孢曲松。于2022年10月13日15:30行经皮胸腔积液引流术。患者取坐位，经B超选定左后侧胸腔穿刺点后，术区常规消毒，2%利多卡因局部浸润麻醉至胸膜，进穿刺针5cm，抽出淡黄色浑浊液体约50mL，送细菌培养加药敏试验，嘱卧床休息，术中患者无明显不适，术后安返病房。2022年10月14日患者术后，诉疼痛难忍，活动或咳嗽时加重，患者穿刺术后无渗液、局部疼痛明显，敷料干燥整洁，引流管通畅，引出黄脓性液体120mL，现气喘、气短好转，在原方案基础上给予甲硝唑冲洗，继观。2022年10月17日
患者诉仍感气喘、气短，活动后加重，左侧胸壁疼痛不适，不能平卧。患者入院后经左氧氟沙星联合头孢曲松两联抗生素联合治疗，胸腔穿刺引流术等治疗，现病情未见明显好转，且感染指标逐渐上升，据患者临床症状及检验结果，目前感染未及时控制，病情向家属告知，申请使用头孢哌酮/舒巴坦抗感染治疗同时，再次在彩超下行胸腔穿刺引流，但患者家属要求转院进一步诊治，经请示上级医师后，通知出院。微生物检验于2022-10-13日送检胸腔脓液，接种血平板，麦康凯平板。经37℃培养24小时后麦康凯平板不生长，血平板上形成针尖大小菌落，呈斗笠状、草帽状，中间隆起，边缘扩散样生长，48-72小时后逐渐增大，随着培养时间延长，血平板上菌落周围可呈现草绿色改变，用滤纸蘸取菌落呈现黄色。菌株经滤纸片-20℃冷冻保存后送上级医院鉴定，Autof
ms1000质谱仪鉴定为侵蚀艾肯菌，见图6-11。图6 血平板78小时菌落整体形态图7 血平板24小时局部菌落（放大3倍）图8 血平板48小时局部菌落（放大3倍）图9 血平板72小时局部菌落（放大3倍）图10 滤纸蘸取菌落呈现黄色图11 质谱鉴定结果生化反应：氧化酶试验阳性，经DL-96ⅡNE板条鉴定，生化反应如下：不发酵葡萄糖，硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶阳性，赖氨酸脱羧酶阳性，触媒、靛基质、尿素酶试验阴性，枸橼酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐阴性。见图12-13。图12 氧化酶试验阳性图13 DL-96ⅡNE生化反应镜下形态：标本直接涂片可见大量白细胞及革兰阴性杆菌，并伴有吞噬现象，菌落涂片染色呈革兰阴性杆菌，菌体细长。见图14-17。图14 标本直接涂片革兰染色（1000倍）图15 标本直接涂片革兰染色（1000倍）图16 标本直接涂片革兰染色（1000倍）图17 菌落涂片革兰染色（1000倍）03案例分析艾肯菌属隶属于细菌域，变形杆菌门，β-变形杆菌纲，奈瑟菌目，奈瑟菌科。侵蚀艾肯菌（Eikenella
corrodens）是艾肯菌属中的唯一菌种。侵蚀艾肯菌为革兰阴性球杆菌，大多呈细长、笔直、两端圆、长1.5～4μm，该菌无芽孢、无鞭毛、不产生荚膜。侵蚀艾肯菌是兼性厌氧菌，对营养要求较高，初次分离需要氯化血红素，在36℃含3%～10%CO2的环境中生长良好。不能在MH、HTM、营养琼脂及中国蓝琼脂平板上生长。生长较慢，在36℃含5%CO2的条件下生长最好，多数菌株通过分解多聚半乳糖醛酸而侵蚀琼脂（呈凹陷生长）。初次分离时，菌落呈灰色透明（有光滑或粗糙两种类型的菌落），但延长培养时间菌落变成浅黄色。在5%羊血琼脂平板上经24小时孵育后，形成针尖大小的菌落。孵育48小时形成光滑、湿润、圆形、半透明的小菌落。（不易与其他细菌相区别）。孵育96小时后，可形成干燥、扁平、圆形、透明、中间突起、不溶血、边缘呈扩散生长的斗笠样菌落、草帽样菌落、扩散型菌落、铆钉样菌落或光滑型菌落。有文献报道，在添加了5mg/L克林霉素的选择性培养基上可显著提高侵蚀艾肯菌的分离率，但要注意与常规培养基一起使用，以免漏检其他致病菌。侵蚀艾肯菌不分解糖，氧化酶试验阳性，硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶阳性，赖氨酸脱羧酶可变，触媒、靛基质、尿素酶及七叶苷试验阴性。有触酶呈弱阳性的菌株报道。培养时间较长时菌落周围培养基可呈草绿色，用棉签抹取菌苔可见黄色。该菌的纯培养物有一种类似于嗜血杆菌的特殊气味。体外试验该菌对青霉素G有大的抑菌圈。侵蚀艾肯菌是人类黏膜表面正常菌群的一部分，经常从上呼吸道标本中分离出该菌，也可从胃肠道或泌尿生殖道标本中分离到，通常不致病，只形成带菌状态。当机体免疫力下降或黏膜表面破损时，此菌进入周围组织引起感染，如软组织脓肿、中耳炎、鼻窦炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、败血性关节炎及术后感染等，但该菌常与其他细菌一起引起混合感染，此类感染常发生在头颈部或腹部。在人咬伤感染标本中经常分离到此菌[1]。04案例总结侵蚀艾肯菌是艾肯菌属唯一的菌种，营养要求较高，典型菌落形态需要48-72h才能形成，因而培养及鉴定较困难。基层实验室由于硬件设施欠缺不能鉴定至种，但经过学习，根据菌落形态以及氧化酶、触媒、赖、鸟氨酸试验可初步鉴定，经24小时培养后菌落较小，对光调整角度仔细观察可见菌落周围放射状扩散生长是其特点，延长培养时间可获得典型菌落，也可将菌株用无菌滤纸片冷冻干燥保存，上送至上级医院准确鉴定。侵蚀艾肯菌可导致多部位感染，近年来已有多篇报道[2-5]。由于条件限制，本实验室未能向临床提供药敏试验结果，经验性使用抗菌药物亦未取得良好效果，可能与患者年龄大又存在基础疾病有关，应积极使用外科引流冲洗可能效果更好。微生物检验人应加强自身学习，尤其对苛养菌、少见菌积极关注，及时与临床沟通，及早的鉴定、报告临床，为临床治疗尽可能多的提供依据。05专家点评点评专家：酒泉市第二人民医院刘春萍副主任检验师侵蚀艾肯菌隶属HACEK菌属，较难培养和鉴定，此菌培养24小时后菌落较小，不易辨识，作者克服基层医院仪器设备欠缺困难，最终准确鉴定了这株少见菌，值得我们基层微生物检验人借鉴和学习。基层工作人员应不断学习总结，提高少见菌的分离鉴定水平。参考文献[1]陈东科,孙长贵,魏莲花,等.实用临床微生物学检验与图解[m].北京:人民卫生出版社.2011.1:480-482.[2]张康，白宇哲，时宇，等.侵蚀艾肯菌致胫骨慢性骨髓炎一例报告[J].中国骨与关节杂志.
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