做出一个成功的流式结果，电压要调节好，抗体要滴定好，还有一点很重要，就是补偿要调节好。
这里，从美天旎公司的技术视频https://www.youtube.com/watch?v=jCQC-86fCN4 上截取部分图片，与大家分享补偿调节的要求和原则。
首先来看一下正确和错误的补偿调节，下图中，左侧是未调节补偿的，中间是正确调节补偿，右侧是补偿过度的，判断正确补偿的指标就是阴性细胞和阳性细胞群的MFI：
了解了这点，再掌握以下的补偿调节原则，基本上就能横着走了：
（1）用来调节补偿的对照需单染；
（2）标本需要同时包含阴性细胞群和阳性细胞群；
（3）对于无法找到明确阳性细胞群的，可用相同荧光标记的其它抗体替代（串联染料除外）；
（4）尽量用最亮的标记，例如调节淋巴细胞的PE-FITC，CD7 FITC和CD3 FITC两者，选择CD3更好。
（5）调节补偿的对照中包含的荧光素必须和实际使用的荧光素相同（例如不能用FITC代替GFP，也不能用GFP代替FITC）；
（6）串联染料调节补偿必须不同批次、不同种类需另外调节。
（7）阳性细胞和阴性细胞群之间的自发荧光水平应该相同。
（8）可用补偿微球代替细胞（流式中文网注：这一点我不太赞同，至少在临床标本上做不到完全替代，不过可能跟用了串联染料有关，也可能跟背景荧光不同有关）。
（9）从来不要做无补偿对照的实验。
其中的第3点和第6点，来看一下下面这张图就知道了，同样是APC-Vio770荧光，用CD8和CD45RA调节出的补偿值就不同：
（责任编辑：lgh）
