“老师，我记得科室是用血平板做链球菌药敏试验，那肠球菌药敏试验是否也选用血平板？”实习生A一脸纠结的问道
我还没来得及回应，实习生B立即回复道：“我觉得链球菌培养时营养要求高，则应选用血平板，肠球菌在普通营养基上生长良好，所以用MH平板做药敏试验就可以。”
“这个血平板就是我们平时培养细菌的哥伦比亚血琼脂平板（CNA）吗？”实习生A继续问道。
“好像是的！”实习生B不肯定地回答。
听到两位实习生的对话，我对他们的求知和疑问精神表示欣赏和支持，但是也很担忧，他们对临床微生物学最常规的药敏感性试验—纸片扩散法（K-B法）的基本知识巩固不牢固，对药敏平皿的认识和选择处于混淆不清状态，会直接导致药敏结果的不准确，延误患者的正确治疗。之后，我为他们讲解了K-B法药敏平皿的要求与原则，具体如下：
药敏试验培养基的选择具有一定的原则和要求，不以个人经验或爱好而更改。为了使临床试验和医疗保健服务水平具备一致的标准，许多国家或机构制定了不同的参照标准。由于参照标准有所差异，故药敏培养基的要求也有所不同。我国药敏试验结果判断标准参照美国CLSI标准文件，则要求除了特殊菌群，K-B法所用的培养基必须是M-H培养基；英国参照的标准BSAC则要求培养基为ISO培养基，而M-H营养琼脂只适用于葡萄球菌的药敏试验。因此在工作中，我们要严谨的参照CLSI，根据不同菌群的需求选择合适、正确的药敏培养基。
培养基的成分和质量是保证药敏结果准确性的先决条件。培养基对药敏结果的影响因素具体如下：
1、pH：pH的变化可导致抑菌圈直径变大或变小。
2、培养基中含有能拮抗菌药活性的物质：如钙、镁离子能降低氨基糖苷类药物的抗菌活性。
3、培养基的厚度：标准厚度为4mm,厚度>4mm，抑菌圈则会变小，<4mm,则会变小。 4、培养基的湿度：使用药物平皿前一般先在室温平衡半个小时，使培养基表面干燥，培养基湿度过高不利于细菌的生长或对抗菌药起到稀释作用。 5、培养基的硬度：硬度过高不利于抗菌药在琼脂中的扩散，可导致抑菌圈直径变小。 6、营养条件：营养条件太差不利于细菌的生长，抑菌圈直径变大；反之，培养及营养条件太好会让抑菌圈直径变小。 将这些原理和原则解说后，针对他们对话中的问题，我一一进行了剖析： 根据CLSI，绝大多数细菌药敏试验琼脂均为标准的M-H琼脂，M-H琼脂基本不含有抑制磺胺类药物和四环素类药物抗菌活性的物质，可满足大多数细菌的生长需要，肠球菌对营养要求不高且生长速度较快，因此可选用M-H琼脂（MHA），而不是血平皿。对于大多数细菌，MHA是不需要添加羊血，血液或血清中的蛋白会不同程度结合抗菌药分子，影响了抗菌药物的活性，如羊血中的某些成分可抑制磺胺类药物和四环素类药物抗菌活性，同时也可影响新生霉素、萘夫西林及头孢菌对肠球菌的药敏结果。 溶血链球菌、肺炎链球菌等营养要求高的苛养菌则需要使用M-H琼脂+5%脱纤维羊血培养基，也叫M-H药敏试验血琼脂平板（MHBA）。MHBA与普通的分离细菌的血平板或者哥伦比亚血平板（CNA）虽然长相相似，但配方及产业标准（如pH、湿度等）均不一样，是不能相互代替使用的。为了比较肺炎链球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培养基上的药敏结果，在其他条件均一致的情况下我们分别用MHBA和CNA做了药敏试验，结果发现，CNA的药敏结果抑菌圈直径偏大，细菌生长情况较差，从而导致“假敏感”结果。 因此，作为一名合格的微生物检验人员，我们应该时刻遵守操作规程，牢记标准要求，熟读规则原理，杜绝含糊不清、似是而非，才能确保结果的准确性。 （责任编辑：lgh）
