在过去数十年，哺乳动物的细胞周期已经被研究得十分透彻，尽管在细胞周期中发现了很多检查点（Checkpoint），但是目前科研中大多数还是以核内的DNA含量大致分为三个阶段：
G0/G1期：细胞静止或未分裂时，DNA含量正常。
S期：DNA开始合成、复制。
G2/M期：DNA含量变成静止时的两倍，并开始分裂为两个细胞。
染色前，先要了解你所用的流式细胞仪，知道流式细胞仪配备了什么样的激发光源、什么滤光片，才能选择最合适的核酸染料。
488nm激光器
可选择碘化丙啶（PI）、7氨基放线菌素-D（7-AAD）、SYTOX Green等。
640nm激光器
可选择TO-PRO-3 iodide或DRAQ5™。
紫外激光器
可选择Hoechst系列染料。
选好染料之后，下一步要考虑的就是如何使染料进入细胞内。
大多数情况下，需要预先进行细胞固定（多用乙醇、甲醇、多聚甲醛等）、破膜（例如Triton-X100、NP-40、皂素等），但这么做就会使细胞死亡。
如果希望细胞仍然保持活性呢？那么你的选择就很有限了，只有少数几种染料可以不需要固定、破膜就能够进入细胞，例如Hoechst 33342、DRAQ5、DyeCycle等染料，但是对于每种细胞，染料的浓度、孵育时间还是需要优化过的，否则浓度过大、时间过长还是会造成细胞死亡的。这种活性染料大多是用于分选等实验。
染好之后，就轮到上机了，这里有一点需要强调的是，一定要用LIN（线性）模式获取，因为细胞周期的DNA倍增很简单，就是两倍关系，你如果用LOG模式反而使细胞周期区分不开来。今天有一位FLOWER在流式中文网上兑换流星福利中心（http://www.flowcyto.cn/bbs/tmall.php）兑换了一份数据分析服务，想请我分析细胞周期，然而很遗憾的是，他悄悄用了LOG模式获取，最终导致各细胞周期之间聚成一团，无法正常分析。
此外，获取、分析的时候，排除细胞粘连体也十分重要，不同仪器采用的方法会有所不同，我们之前在流式中文网上发过此类资料，在此不详述，参见：
PI检测细胞周期时如何排除粘连体（http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2164-1-1.html）
[视频] 什么是粘连体？如何排除粘连体？（http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4333-1-1.html）
在获取的时候，采用低速（LOW）可以使CV（变异度）尽可能最小，所以如果能用低速尽量用低速。
如果你上述几点都做到了，那么恭喜你，你的细胞周期实验成功了。
（责任编辑：lgh）
