金黄色葡萄球菌、肠球菌、化脓链球菌、无乳链球菌的鉴定流程
触酶试验检验方法
1. 用小木棒或竹签挑取若干单个可疑待测菌落（避免挑到血琼脂，以免血液中的过氧化物酶产生假阳性反应），将木棒或竹签投入到触酶液小试管中（手柄在上）；
2. 观察是否立即剧烈产生大量气泡。见下图。
血浆凝固酶试验检验方法
1. 向一支干粉兔血浆小试管中加入约0.5mL生理盐水使其复溶；
2. 用人造丝拭子（勿用医用棉签）或接种环刮/挑取可疑待测菌落至试管中，洗脱，靠壁挤压拭子头，使其乳化，形成较浓菌悬液，拧上试管帽；
3. 35℃±2℃孵育，至少每小时观察一次直至4h，一旦出现凝固就判为阳性。观察时切勿振摇或颠倒试管，应横置观察，4h不凝固者为阴性；试验应同时做阳性、阴性对照。
胆汁七叶苷试验（B-E）检验方法
1. 取1测试胆汁七叶苷小试管，用于每一待测菌；
2. 拧开试管帽，用人造丝拭子（勿用医用棉签）或接种环刮/挑取可疑待测菌落至胆汁七叶苷小试管中，洗脱，靠壁挤压拭子头，使其乳化成较浓的菌悬液；
3. 35℃±2℃，孵育1h~2h；观察是否有棕黑色或黑色产生。
吡咯烷酮试验（PYR）检验方法
1. 用PYR缓冲液A液浸润PYR测试条末端滤纸；
2. 用接种环从适合的琼脂培养基上挑取可疑待测菌落，在末端滤纸上涂抹开或直接蘸取菌落；
3. 放置于密闭容器（如空平皿）；35℃±2℃，孵育5min~10min；
4. 滴加一滴PYR缓冲液B液至末端涂抹细菌处，观察是否有红色产生。
马尿酸盐试验检验方法
1. 取一支马尿酸盐试管，用于每一待检菌；
2. 用人造丝拭子（勿用医用棉签）或小木棍或接种环刮/挑取可疑待测菌落至马尿酸钠溶液小试管中（不要挑取到琼脂，因为蛋白质的存在可引起一种弱阳性反应），洗脱，靠壁挤压拭子头，使其乳化，形成较浓菌悬液，拧紧；
3. 35℃±2℃，孵育1.5h~2h；
4. 拧开试管帽，滴加约0.2mL（滴瓶约4滴）茚三酮溶液并轻轻摇动使其混匀，拧上试管帽；
5. 35℃±2℃，孵育5min~10min；观察是否有深紫蓝色产生（孵育时间超过20min可产生假阳性结果）。
（责任编辑：lgh）
