多重指标检测技术，可以同时检测单一样本中的多个指标，节省样本，耗时更少，大大提高工作效率。
把一定大小、不同荧光染料染色的微球（统称编码微球），共价交联上针对特定检测物的抗原或抗体、核酸探针；加入待测物或待测的扩增片段，形成复合物再与标记荧光素结合；结合流式细胞检测类仪器进行信号强度分析，从而识别编码微球并可进行各指标的定性/定量测量。
截止2015年1月，该技术产品在美国已有超过200个、超过1000种指标被FDA批准；国内也陆续有产品获得CFDA批准；包括免疫学、蛋白质组学、核酸检测、基因研究、精准医疗等领域，在肿瘤、自身免疫病、传染性疾病、炎症等疾病诊断及监控方面应用广泛。
下面将以AimPlex多因子检测试剂盒中的Human Th1/Th2/Th17 7-Plex为例，介绍流式细胞仪检测多重指标检测技术。
【检测原理】
与常规的夹心法免疫测定相同，荧光微球偶联包被上特异性抗体，可结合待测物中的特定蛋白抗原，如细胞因子等，形成免疫复合物，免疫复合物再与生物素标记的检测抗体结合，生物素标记的抗体与链霉亲和素–PE反应，利用流式细胞仪检测荧光，从而实现对蛋白抗原的检测，结合抗原标准品的标准曲线，可实现对蛋白抗原的定量检测。
Human Th1/Th2/Th17 7-Plex试剂中含有4μm和5μm两种直径微球，其中4μm直径微球由三种荧光强度的微球组成，分别包被了TNFα、IL-2、IFNγ，5μm直径微球由四种荧光强度的微球组成，分别包被了IL-3、IL-6、IL-17A、IL-10。利用流式细胞仪区分微球大小和荧光强度的能力，可同时分析待测物中的上述7种细胞因子。
【试剂】
偶联有特异性抗体的微球
生物素标记抗体
链霉亲和素-PE
抗原标准品
抗体稀释液、缓冲液
【样本制备】
1. 加入45μL捕获微球混合悬液至流式管中
2. 分别加入标准品和稀释样本45μL，室温避光孵育1h
3. 洗涤后，加入25μL生物素偶联的检测抗体，室温避光孵育30min
4. 洗涤后，加入25μL链霉亲和素标记的PE工作液，室温避光孵育20min
5. 洗涤后，加入150μL洗液，重新悬浮微球，在BriCyte E6流式细胞仪上测定
详细操作步骤请参见试剂说明书。
【数据采集和分析】
采用BriCyte E6流式细胞仪配套MRFlow软件进行数据采集
1. 建FSC/ SSC线性散点图，区分不同大小的微球；较小的微球群设为P1，较大的微球群设为P2
2. 建PE/ APC（编码微球的荧光素）散点图，分别分析P1、P2门内微球，确定各因子位置，设门圈出各因子
3. 建PE直方图，依次分析2中所有因子，确定各因子在PE方向的荧光强度MFI
4. 以相同条件分别测试抗原标准品及待测样本，计算各个细胞因子浓度
【图形及结果】
利用流式细胞术区分待测物中的各个细胞因子，获得每个细胞因子的荧光强度，根据相应标准曲线计算得到对应因子浓度。
（责任编辑：lgh）
