利用五种白细胞自身不同的化学性质。应用相应的化学试剂加以区分：
由于嗜酸性（或嗜碱性）粒细胞均有较强的碱性（或酸性），因此在特殊的溶血剂作用下，经过特定时间及温度的孵育，可使除嗜酸性（嗜碱性）粒细胞之外的所有细胞溶解或萎缩。经处理之后的细胞根据阻抗脉冲计数法，可得相应嗜酸性（嗜碱性）细胞有效数值。
利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色，测定其酶反应强度，对白细胞进行分析。血液中五种白细胞的过氧化物酶活性排列顺序为：嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>单核细胞。淋巴细胞和嗜碱性粒细胞均无过氧化物酶。将待测血液加入清洗剂和甲醛的等渗液体内经孵育，再加入过氧化氢和四氯一萘酚，细胞内过氧化酶分解产生氧离子，使四氯一萘酚显色并沉淀，并定位于酶反应部位。根据酶反应强度的不同，利用光电检测技术测定相应吸光度值的方法，用以区分嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞。
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