作者 | 翟梓杰单位 | 深圳市龙岗区人民医院前 言检以求真,验以求实,这句话不仅体现了我们检验人对于检验结果的严格要求,同时也反映了我们求真务实的态度。患者得到精准有效的诊疗离不开检验科真实准确且及时的检验结果。在急诊检验室上班,面对急危重患者的标本,专业组长要求我们快速发出结果的同时,又要保证结果的准确性。今日就一例急诊科急性胰腺炎患者的严重脂血标本检测血常规,如何快速排除脂血干扰并获得相对准确的血常规报告展开讨论。案例经过在平淡无奇的一天审核血常规标本时,发现并不匹配“Rules
of
Three”即HGB×3=HCT,RBC×3.3=HGB和RBC×9=HCT三个数学关系。该结果血红蛋白和红细胞计数并不匹配,继续往下看指标,患者的MCH和MCHC也是异常的增高。这显然触发了我科的复检规则,于是核对标本状态和仪器报警提示信息,原来是标本严重脂血引起。做血生化的老师时常描述“牛奶”血。如下图1~2所示:图1图2案例分析对于定岗在急诊检验的我来说,此类情况,显然不是第一次遇到。由于仪器方法学原因,常规血红蛋白的测定原理是比色法:亚铁血红素中Fe3+被十二烷基磺酸钠(SLS)氧化,形成SLS-HB衍生物,在555nm波长进行比色测定得出血红蛋白浓度。而对于脂血严重的标本,因为本底异常增高,通过比色法直接测定会导致血红蛋白假性增高,而MCH=HGB/RBC,MCHC=HB/HCT,因此计算值MCH和MCHC也会假性增高。
如果患者是严重贫血,测得的血红蛋白值可能会出现正常值的情况从而耽误医生诊治,会出现漏诊的可能。为了排除脂血(主要是甘油三酯和乳糜微粒)引起的假性增高,根据传统操作,较为经典的方法就是“血浆置换”:用0.9%的生理盐水去洗涤红细胞,反复洗涤,直到血浆澄清透亮。然后将等量的血浆置换成等量的生理盐水,再去检测血红蛋白。然后得到较为可靠的血红蛋白值。但是由于血浆置换法操作繁琐,费时费力,而且对操作技术要求较高:血浆置换过多容易吸到红细胞层造成Hb 降低,血浆置换过少又不能很好避免脂血的干扰,此外可能还有基质效应等问题。曾经有看过报道说华西医院的老师研究出了一种利用公式快速换算的方法:将脂血标本上机检测,得到HGB校正前、HCT校正前等参数,再將其低速离心(离心力310-550g)2~3分钟,轻轻取出,吸出脂血浆:再将脂血装进行全血细胞计数(CBC),检测出脂血装中假的HGB浓度(HGB脂血血浆)。计算公式:HGB校正值=HGB校正前-HGB脂血血装(1-
HCT校正前〕,MCH校正值=HGB校正值/RBC校正前:MCHC校正值=HGB校正值/HCT校正前。以上两种方法我都测试过,毫无疑问,是可行的。思考:除了以上两种方法,还有其他方法吗?于是我继续查找资料,终于,我找到了一篇2021年发表在中华检验医学杂志的论著,文中通过大量实验数据比对试验,谈到SYSMEX
XN‑20
A1机型的RET通道可以排除严重脂血干扰。于是我尝试的开启该通道去检测标本,RET通道得到的结果与血浆置换和公式法得出的结果惊人的相似,具有很好的相关性。如图3~4所示:图3图4总 结通过文献学习和请教厂家应用工程师得知:光散射法RET通道检测HGB的原理:通过激光束照细胞,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光,借检测前向散射光强度、侧向散射光强度等信息,可获得粒子大小,颗粒内部复杂结构等信息,该方法不受浊度的影响。文献中提到“非脂血标本光散射法Hb低值组和中值组结果
与比色法差异无统计学意义(P>0.05),高值组2种方法差异有统计学意义(P<0.05)。光散射法Hb与比
色 法 Hb 偏 倚
均 在 可 接 受 误 差 范 围 内
。Bland‑Altman偏倚图表明2种方法80%偏倚<3.5%且2种方法有良好的线性回归关系(r=0.999),结果见表1、图5”。表1 非脂血标本Hb2种检测方法比较
图5 非脂血标本Hb光散射法与比色法结果比较另外作者也提到:对于非脂血和脂血标本,光散色法检测Hb 有良好的精密度(CV≤1.5%)。对于非脂血标本,光散射法Hb与比色法Hb
2种方法具有等效性,且在卫生部临床检验中心室间质量评价可接受范围内(CV≤6.0%)。对于脂血标本,虽然目前实验室常用血浆置换法,但该法并非金标准,所测得的Hb并不
能代表该标本非脂血状态下真实的Hb,为此我们设计了反向试验,即将非脂血标本血浆以不同浓度脂肪乳替代,研究高脂标本光散射法Hb与真实Hb的差异,结果如下:比色法受脂血影响较大,且与TG浓度相关。参考资料:[1]窦敏, 林燕辉,郭小未, 等. 光散射法检测脂血标本血红蛋白的应用评价[J].中华检验医学杂志,
2021, 44(12): 1182-1189.[2]Journal of Clinical Laboratory Analysis 27: 341–345 (2013)[3]全国临床检验操作规程
第四版 尚红END
(责任编辑:labwebx)
探讨脂血标本精准检测血常规除血浆置换之外的方法
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