溶血对干化学和湿化学法测定血清胆红素的影响

长期以来，人们将人体血清胆红素描述为“总胆红素”，“直接胆红素(亦称结合胆红素)”和“间接胆红素(亦称未结合胆红素)”［1］。而干化学法则将胆红素分为“总胆红素”、“结合胆红素”、“未结合胆红素”和“δ胆红素”，并认为，总胆红素=结合胆红素-未结合胆红素+δ胆红素，直接胆红素=总胆红素未结合胆红素=结合胆红素+δ胆红素［2］。为了解溶血对胆红素测定的影响，我们测定不同血红蛋白浓度标本的总胆红素、结合胆红素，并进行方法学比较，现报告如下。
　　1  材料与方法
　　1.1  实验材料
　　1.1.1 
　　1.1.1.1  湿化学方法  日本OLYMPUS AU-1000全自动分析仪。
　　1.1.1.2  干化学方法  美国VITROS 250全自动生化分析仪。
　　1.1.2  试剂
　　1.1.2.1  湿化学方法  日本OLYMPUS配套试剂。
　　1.1.2.2  干化学方法  美国VITROS配套试剂。
　　1.2  实验方法  用两种方法分别测定30份不同浓度正常血清的总胆红素和结合胆红素各2次，取平均值，见图1、图2。
　　取1份无溶血混合血清。各分成4份，其中3份加入不同浓度的血红蛋白液(Hb)，造成人工溶血现象，并将对照组加入同体积生理盐水，用两种方法测定各管中的总胆红素和结合胆红素(重复测定3次取平均值)。采用t检验比较溶血对两种方法的影响。
　　2  结果
　　干化学与湿化学测定胆红素正常组结果比较见表1、表2。干、湿化学测定总胆红素结果差异无显著性(P＞0.05)，γ=0.992。直线回归方程Y=1.01X+0.06。而两种方法测定结合胆红素差异有显著性(P＜0.01)。
　　溶血时，干化学法测定结合胆红素与无溶血时差异无显著性(P＞0.05)，总胆红素测定与无溶血时差异有显著性(P＜0.01)；溶血时，湿化学法测定结合胆红素、总胆红素与无溶血时差异均有显著性(P均＜0.01)。
　　表1  不同浓度Hb对干、湿化学法测定TBIL的影响方法(略)
　　注：与Hb浓度为0比较，*P＜0.0１；ΔP＜0.0１
　　表2  不同浓度Hb对干、湿化学法测定Bc的影响方法(略)
　　注：与Hb浓度为0比较，*P＞0.05；ΔP＜0.01
　　图1  干、湿化学法TBIL测定相关图(略)
　　图2  干、湿化学结合胆红素测定相关图(略)
　　3  讨论
　　由本实验可知，干、湿化学两种方法测定TBIL差异无显著性，与黄恩芳［3］得出的结论相同，两者结果差异无显著性(P＞0.05)。
　　在干化学法中认为TBIL=Bc+Bu+δB。Bc与DB不同，DB包含约67%～75%的双葡萄糖醛酸胆红素和约85%的δB［4］。然而，湿化学中认为DB=Bc。由本实验可知，湿化学中的DB与干化学中的Bc是不同的两个概念，其测定结果也差异有显著性，二者不可混为一谈。
　　溶血对两种方法TBIL测定均有影响，正干扰明显。而干化学测Bc则不受溶血(Hb<12 g/L)影响(P＞0.05)，湿化学正干扰明显(P＜0.01)。建议临床溶血标本测定Bc时采用干化学法。 　　参考文献： 　　［1］  Lott J A.New concepts in serum bilirubin measurement［J］.Laboratory Management,1987，4:4148. 　　［2］  VITROS干片方法学手册. 　　［3］  黄恩芳，张文，高玲，等.陕西［J］，2001，2(16)：1214. 　　［4］  Cox C J，Valdiserri RO，Zerhe T，et al.Ektachem bilirubin fractions in an adult outpatient population［J］.Laboratory Medicine，1987，18(3)：159161.