肌红蛋白定量测定

1. 原理
 
    抗原或抗体包被的微粒子,是由多孔高分子粒子制成,具有很好的亲水性,悬浮性极佳,微粒子可与玻璃纤维不可逆结合,从而提高了反应的特异性。标本与微粒子以一定比例混合,标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应,以反应终了后,反应液的一部分被移到玻璃纤维上,洗去未反应的被检物质与其它 的不要成份,加入基质液,基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。当该物受荧光照射后就产生荧光,测定荧光强度的分化率,从而决定被测物质的浓度。
 
    2. 标本采集:
 
    2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。
 
    2.2 标本种类:血清或血浆。
 
    2.3 标本要求:采集血清样本,取被检者静脉血,用无菌取血针抽取病人静脉血3ml,收集干燥试管中,室温放置不超过8小时,2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本,用无菌取血针取被检者静脉血3ml,收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中,室温放置不超过8小时,2000转/分离心20分钟备用。
 
    3. 标本储存:待测样本室温不超过8小时,4-8℃ 不超过72小时,-20℃可长期保存,避免反复冻融。
 
    4. 标本运输:室温运输。
 
    5. 标本拒收标准:细菌污染,严重溶血或脂血标本不能作测定。
 
    6. 试剂:
 
    6.1 试剂名称:肌红蛋白诊断试剂盒。
 
    6.2 试剂生产厂家:美国雅培制药有限公司
 
    6.3 包装规格:100Test/kit
 
    6.4 试剂盒组成:肌红蛋白诊断试剂。
 
    6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存2-8℃条件,有效期12个月。
 
    7. 仪器设备:
 
    7.1 仪器名称:AXSYM免疫自动分析仪
 
    7.2 仪器厂家:美国雅培公司
 
    7.3 仪器型号:AXSYM Tm型
 
    7.4 仪器校准:本仪器校准由厂家工程师负责校准。
    
8. 操作步骤:
 
    8.1 样本处理:取待测样本血清或血浆置于样本杯中(不能有纤维蛋白,不能有气泡)。
 
    8.2 仪器准备:检查纤维杯,反应杯数量满足实验需要,废物桶和废液桶是否连接好,仪器的光路是否正常,环境温度是否符合要求,打印机的连接。
 
    8.3 试剂准备与检查:从冰箱取1号液放入仪器,检查所有试剂和缓冲液量是否足够,是否在有效期内。
 
    8.4 定标
 
    8.4.1 定标步骤:输入主标正曲线(工厂定标),从MAIN MENU选择STORED RESULTS,选择CALIBRATION REVIEW,选择F4-NEWLOT,选择F4-SCAN用条码阅读器扫主梭正曲线或用键盘手工输入条码数据,选择F6-SAVE储存主梭正曲线数据.
 
    8.4.2 定标申请:从MAIN MENU中选择ORDERLIST,选择F4-CAL,选择项目肌红蛋白,输入样品架位置,输入标准品的批号和有效期,选择F6-ADD确认,选择F1-EXIT追回。
 
    8.4.3 定标运行:检查试剂盒和消耗品,检查库存,按RUN运行.
 
    8.5 质控:质控品分高、中、低三种。
 
    8.5.1 质控定义:从MAIN MENU中选择CONFIGURATION,选择CONTROL,选择肌红蛋白项目,输入质控名(每个质控名带一个质控水平,高、中、低),选择F2-ADD CONTROL,选择F6-CONTROL DETAILS,选择数据区域(2SD范围),输入质控信息,按ENTER键,选择F6-SAVE保存质控信息。
 
    8.5.2 质控申请:从MAIN MENU选择ORDERLIST,选择F5-CONTRL,选择项目肌红蛋白,输入样品架位置,选择分析的质控品水平,高、中、低,选择F6-ADD确认,按F1追加MAIN MENU。
 
    8.5.3 质控运行:检查试剂,消耗和库存,按RUN键运行。
 
    8.5.4 质控浏览
 
    8.5.4.1 质控结果浏览:从MAIN MENU选择STORED RESULTS,选择VIEW STORED QC RESULTS,选择浏览肌红蛋白质控结果,选择F6-DETAILS。
 
    8.5.4.2 质控图浏览:从MAIN MENU选择LEVERY-JENNINGS QC,选择项目肌红蛋白,选择质控水平,选择F5-GRAPH浏览。
 
    8.5.5 质控要求:所有质控水平必须控制在2SD范围内。
 
    9. 标本检测常规操作:
 
    9.1 申请病人样品测试
 
    9.1.1 单个病人样品申请:从MAIN MENU选择ORDERLIST,选择F6-PATIENT,输入样品架位置编号和样品编号,可选择输入病人编号、病人姓名、病人说明等资料。选择肌红蛋白项目,可选择是否急诊项目,选择F6-ADD确认。
 
    9.1.2 样品批处理申请:从MAIN MENUT选择ORDERLIST,选择F6-PATIENT,选择F2-BATCH,输入起始样品等的位置,输入起始样品编号,输入测试的样品数,选择项目肌红蛋白,选择F6-ADD确认。
 
    9.2 检测结果查看:
 
    从MAIN MENU选择STORED RESULTS,选择PATIENT REPORT,选择要查看的编号,选择F6-DETAILS。
 
    9.3 检测结果打印和保存:清单打印和详情单打印,结果硬盘保存,软盘保存,传输到PC电脑保存。
 
    10. 结果计算:利用点对点数据产生方法来产生标准曲线利用率A的方法来产生主标准曲线,并根据标准曲线计算最终样品浓度.
 
    11. 参考范围:<116.3ng/ml

(责任编辑:zqg)

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