1.血红蛋白变异体对于各种HbA1c检测系统的影响
血红蛋白变异体杂合子存在时，红细胞中有部分异常血红蛋白，计算HbA1c时不应该包含异常血红蛋白，亲和层析法、免疫法和酶法计算HbA1c时都包含异常血红蛋白，结果准确性的关键在于血红蛋白变异体糖化率是否与正常血红蛋白A的糖化率一致。而IE—HPLC和电泳法剔除了血红蛋白变异体部分，结果的准确性决定于检测系统对血红蛋白变异体的分离能力。有报道显示，由于IE-HPLC不能够剔除变异体而造成结果错误：一例为空腹血糖为5．9 mmol／L，HbA1c为115.8％，使用地贫模式发现HbS含量为37.4％；另一例空腹血糖为9.6mmol／L，HbA1c为4.7％，发现含变异体HbG—Taipei。Lin等以ultra2作为参照系统，采用4种IE—HPLC方法(VariantII、Turbo 2．0、HA一8180、G7和G8)、一种亲和层析法(Bio—Rad In2it)、一种毛细管电泳法(Capillarys 2 Flex Piercing)测定HbC、HbD、HbE和HbS杂合子样本。结果显示，对于HbS杂合子，除Capillarys 2 Flex Piercing外，其他检测系统差异均有统计学意义。对于HbC和HbE杂合子，除Variant 11 Turbo 2．0外，其他检测系统差异均有统计学意义。对HbD杂合子，除Variant 11 Turbo 2．0和in2it外，其他检测系统差异均有统计学意义。部分统计学上的差异未超过CAP推荐的临床最大允许误差[>-I-7％在6％和(或)9％HbA。，水平]。对于HbS杂合子，6种方法均未超过最大允许误差。对于HbC杂合子，G7在6％有临床显著性负偏差，irr2it在6％和9％HbA1c水平超过最大允许误差。对于HbD杂合子，HA一8180在9％HbA1c水平超过最大允许误差。对于HbE杂合子，G7和G8在6％和9％HbA1c水平正偏差超过最大允许误差，in2it在9％HbA1c水平超过最大允许误差。此研究中，Variant lI Turbo 2．0和Capillarys 2 Flex Piercing对于任何一种血红蛋白变异体都没有超过临床最大允许误差。Dessi等也对HbS变异体做了研究，以Capillarys 2 Flex Piercing为参照系统，G8有较大的负偏差；对于一例HbD Iran，VariantⅡ给出的结果为97.3％，G8给出的结果为6.8％，Capillarys 2 FlexPiercing给出的结果为10.7％，并能清晰的分离变异体HbD Iran。
2．血红蛋白变异体纯合子对HbA1c检测系统的干扰
血红蛋白变异体纯合子存在时，血红蛋白中没有正常血红蛋白HbA，因此也无HbA1c理论上高特异性免疫法、酶法以及亲和层析法都能给出糖化变异体而非HbA1c的结果，结果准确程度取决于变异体的糖化率和HbA的糖化率是否一致。IE-HPLC和电泳法如果能完全剔除变异体部分，则只能提示变异体的存在而不能给出结果。Rhea等采用IE-HPLC(Variant 11 Turbo)、免疫比浊法(Synehron System、Integra)和亲和层析法(primus)检测HbSS、HbSC和HbS一13一thalassemia变异体标本，除Variant 11 Turbo显示较大的正偏差，其他3种检测系统给出了相近的结果。按照厂家声明(HbAh>15％)，Variant II Turbo并不能报告结果。虽然包括Primus在内的四种检测系统给出了表面上正确的结果，但均不能提示样本中不含HbA，因为HbSS、HbSC和HbS一13一thalassemia变异体严重影响了红细胞寿命，所以这些结果并不能真正的反映平均血糖水平。Dimeski等利用两种IE—HPLC检测系统未能给出纯合子HbEE的结果，而亲和层析法和免疫法都给出结果。所以，免疫法、亲和层析法以及酶法由于不能提示血红蛋白变异体的存在，HbA1c结果对临床有潜在的风险。
3．HbF对HbA1c检测系统的干扰
有研究表明亲和层析法不受HbF的影响。Curt等以IFCC参考方法(IFCC RM)作为参照系统，采用Tosoh G7、Tosoh 2．2+、Bio．Rad Variant 11、Primus CLC 330／385和Siemens DCA2000五种检测系统，检测不同浓度HbF对HbA1c结果的干扰。结果显示，随着HbF含量增加偏差逐渐变大，当HbF>20％时，G7和VariantⅡ相对于IFCC RM的平均偏差分别为一0．20％和一0，33％，P值分别为0.53和0.05；对于DCA2000、Tosoh 2．2+和CLC 330／385检测系统，当HbF>20％时，偏差分别为一1.92％、-2.00％和一0．98％，HbF对于这3种方法影响差异有统计学意义(P<0．01)。同时发现，即使在超过厂家声明的HbF<15％的上限，两种IE—HPLC(Tosoh G7和Bio—Rad Variant II)仍然受HbF影响较小。值得注意的是，这是第一次采用IFCC参考方法作为参照系统的报道，也是第一次报道HbF干扰影响亲 和层析法HbA1c结果，原因可能是HbF的糖化率低于HbA1c。 总结 综上所述，血红蛋白变异体对HbA1c检测系统有干扰。当存在血红蛋白变异体时，红细胞的寿命可能会改变，这时HbA1c已经不能反映平均血糖水平。因此，实验室应该熟知所用检测系统的局限性，以及所在地区人群中血红蛋白变异体的流行情况，在检测HbA1c时，应关注到血红蛋白变异体的存在，并及时通知临床。 （责任编辑：陈雪礼）
