作者 | 李学勤单位 | 山西白求恩医院检验科案例经过近日值班,发现一例凝血标本TT(凝血酶时间)检测结果失败,于是进行其延长模式测定,凝固曲线如下(图1)。我们都知道典型的凝固曲线呈“S”形(图2),包括四个时期:基线期凝血因子被激活生成凝血酶;加速器和减速期凝血酶将纤维蛋白原水解成纤维蛋白凝块;平台期凝固反应完成。图1 该患者TT凝固曲线图图2 典型凝固曲线图凝固反应曲线会使用公式或程序将原始光测量值转变为凝固时间,其中TT的检测是利用二阶导数法(反应最大加速度)的运算法则。我们仔细查看该凝固反应曲线可以得到以下信息:①基线期不可见;②左侧Y轴吸光度变化从1200开始,提示反应杯中本底较高,需要查看试管中血浆外观;③从纤维蛋白形成曲线(紫色)和纤维蛋白形成速度曲线(浅蓝色)的起始段结合看,在仪器开始检测时,纤维蛋白就已开始形成,提示TT时间可能缩短;④紫色曲线无基线期,直接从峰值开始下降提示在仪器开始监测反应杯时纤维蛋白凝固即进入缓慢形成期,或仪器在开始进行光密度检测时反应杯中即处于纤维蛋白凝块形成中。查看该患者其它凝血项目检测结果如下:其中PT比正常参考范围稍高,APTT正常,TT为什么就如此异常?我们找到标本,观察其状态,发现其呈现重度乳糜状(图3),进行复查后结果一致。并观察标本无肉眼可见凝块形成。图3 标本状态案例分析我们首先查阅了该患者的病例:患者中年男性,3天前无明显诱因出现中上腹部疼痛憋胀,呈间断绞痛,不伴腰背部放射痛,不伴恶心呕吐发热及寒战。辅助检查:血脂四项总胆固醇10.42
mmol/L ,甘油三酯16.53
mmol/L ,高密度脂蛋白胆固醇0.58
mmol/L ,胰腺功能两项报告淀粉酶1004
IU/L ,脂肪酶985.9
IU/L,患者急性胰腺炎诊断明确,禁饮食,于奥美拉唑抑酸治疗,予生长抑素对症治疗,予抗炎抗感染治疗。患者急性胰腺炎诊断明确。我们再回到该标本的检测凝固曲线图。标本的乳糜状态使得反应的本底信号增高,同时反映的速度和加速度不太稳定。而在仪器开始检测时,纤维蛋白凝固已经进入缓慢形成期,故我们分析该标本的TT项目的检测可能受到了急性胰腺炎病理状态的影响。我们都知道急性坏死性胰腺炎时,大量胰蛋白酶入血,可激活凝血酶原,促进凝血酶生成。凝血酶是凝血酶原的活化形式,是一种损伤处血管内皮细胞产生的多功能的丝氨酸蛋白酶,是参与凝血过程各个环节反应的关键酶。它能将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,并使纤维蛋白交联形成血栓;此外急性胰腺炎时,肝肾肺等重要脏器积聚和活化的白细胞通过释放大量炎性介质,可促使血液呈高凝状态。所以该患者TT时间缩短的原因很可能为患者凝血酶原被提前激活,使得血液呈现高凝状态。TT试剂检测原理:TT的检测主要是在样本中加入纯化的凝血酶,将其中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,测量形成凝块所需要的时间。TT试剂盒的主要成分是冻干牛凝血酶。TT检测的主要临床意义包括评估弥散性血管内凝血(DIC),监测肝素抗凝和纤溶治疗,检测是否存在FDP,遗传性或获得性纤维蛋白原质量和数量异常以及纤维蛋白溶解增加。总结我们结合TT试剂的主要成分,进一步确认了该患者出现TT检测结果异常的原因为患者血液中的胰蛋白酶将凝血酶原激活,提前诱发凝血过程,使得纤维蛋白原转化为纤维蛋白的时间变短。因此该患者的TT结果我们最终报告为小于5秒,并备注受胰蛋白酶的影响。我们在日常工作中,要时刻留意样本的异常状态,并结合患者发病情况,准确地发放每一份报告,正确的引导临床大夫做出诊断和治疗,才是我们作为检验工作者的责任所在!【参考文献】[1]姜晓玲,童晨曦,宋银宏.急性胰腺炎的免疫发病机制[J].中国免疫学杂志,2019,35(4):496-499,504.[2]凝血酶时间测定试剂盒(凝固法)说明书.[3]《病理生理学》第八版[4]卢世云,陈登登,林志辉,彭孝伟,潘秀珍.急性胰腺炎血浆凝血功能的变化[J].胰腺病学,2006,6(2):92-94.END
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TT试验结果缩短?不容忽视
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