英国牛津大学的研究人员发表在 Nature Reviews Drug Discovery 期刊上的一篇分析报告，对AAV基因疗法的临床试验进行了系统分析。近年来基因治疗领域研究迅速发展，每年启动的临床试验也在逐年增加，揭示疾病研究机制、推动临床发展，临床前的科学研究无疑是最重要的基石，结合这些不同领域临床研究趋势，是否能给我们临床前研究带来新思路和新思考呢？下面和小编一起，挖掘一下这其中的奥秘。英国牛津大学的研究人员发表在 Nature Reviews Drug Discovery 期刊上的一篇分析报告，对AAV基因疗法的临床试验进行了系统分析。在作者分析的149项特征性临床试验中（94项已完成，另有51项达到了疗效终点）。每年启动的试验数量从2010年的5项增加到2017年的26项。大多数研究都是以安全性和有效性为终点的临床I/II期研究。可供分析的94项已完成的试验大部分集中在眼、肝、肌肉和中枢神经系统这4个器官组织中， 靶器官为肝脏的静脉注射基因疗法用于治疗代谢和血液病、帕金森病、A型和B型血友病一直是临床试验最多的3个适应证。图1. AAV基因治疗靶器官及适应症分析作者对AAV衣壳和启动子使用的演化趋势进行了分析。结果显示，临床中使用最多的仍然是AAV2血清型，AAV2血清型的安全性和有效性证据也是最多的，已完成的试验有40项以上。自2015年以来，使用AAV8和AAV9衣壳完成中枢神经系统（CNS）递送的药物试验数量持续增加，这反映了基因疗法在中枢神经系统疾病中应用的逐步增长。其它新型衣壳，如AAV-LK03、SPK-100和AAV-HSC15也已获得了进展，但安全性和有效性的证据有限。图2. AAV临床实验血清型选择趋势统计显示，临床使用最多的启动子都是泛素启动子（ubiquitous promoter），如CBA、CAG和CMV。在2015年至2019年间，公开启动子的临床试验中，45%都选择了这3种启动子中某一种。然而当我们关注近年来的临床试验，我们可以发现启动子的使用出现了新的趋势，更多的研究者将目光转移到了组织特异性启动子的选择上，有25项以上的临床试验中使用了组织特异性强启动子，如白蛋白和突触素，用以实现基因在特定组织中的表达。同理在肿瘤研究领域，不少研究者也会选择肿瘤特异性启动子，实现肿瘤的靶向性，以减少对健康组织的伤害。图3. AAV临床实验启动子选择了解了AAV的临床研究趋势，小编通过clinical trials数据库进行检索，对现阶段在研AAV基因治疗药物按照不同的疾病领域进行了划分筛选，截止2021.08.17，AAV在研项目有258项，其中76项处于完成状态，小编选取了具有代表性的产品按照适应症进行了整理：01AAV在神经退行性疾病的临床研究AAV载体设计和相关给药技术的进展使得AAV能够在大脑和脊髓中广泛地传递基因，由于中枢神经系统（CNS）中的靶细胞是长寿命的、不分裂的神经元，单次剂量的治疗可以产生持久的、甚至终生的益处，因此 AAV特别适合于神经系统疾病的治疗。适应症 公司 药物名称 临床分期 载体选择 帕金森 Axovant AXO-Lenti-PD 2期 慢病毒载体 MeiraGTx AAV-GAD 1/2期 AAV-GAD Voyager VY-AADC 2期被叫停 数据不全 AAV2-AADC 额颞叶痴呆 Passage Bio PBFT02 1/2期 AAV1 02AAV在眼部疾病的临床研究2017年，FDA批准了罗氏旗下Spark公司的Luxutrna用于治疗RPE65基因突变导致的先天性黑蒙症，标志着基因治疗在眼遗传性疾病上获得了发展成熟。作用于眼部研究的血清型大多为AAV2，由于眼睛是免疫特权器官，血-眼屏障使得眼睛与免疫系统相对独立。使用病毒类载体不易发生免疫应答或全身性不良事件。适应症 公司 药物名称 临床分期 载体选择 RPE65突变导致的先天性黑蒙症 Spark Luxturna 2017年上市 AAV2 BioMarin AAV-RPE65 1/2期 AAV MeiraGTx AAV-RPE65 1/2期 AAV5 糖尿病黄斑水肿 4D Molecular 4D-150 1期 AAV Adverum ADVM-022 2期 AAV.7m8 湿性年龄相关性黄斑变性 4D Molecular 4D-150 1期 AAV Adverum ADVM-022 2期 AAV.7m8 REGENXBIO RGX-314 2期 AAV8 先天性无脉络膜症 4D Molecular 4D-110 1期 AAV Spark SPK-7001 1/2期 AAV Biogen BIIB111 3期 AAV2 CNGB3/ CNGA3突变导致的色盲 Applied Genetic Technologies CNGB3 CNGA3 1/2期 AAV2 BioMarin AAV-CNGB3AAV-CNGA3 1/2期 AAV MeiraGTx AAV-CNGB3 1/2期 AAV8 X连锁视网膜色素变性 Applied Genetic Technologies RPGR 2/3期 AAV2 BioMarin AAV-RPGR 1/2期 AAV Biogen BIIB112 2/3期未达主要终点 AAV8 MeiraGTx AAV-RPGR 1/2期 AAV2 莱伯遗传性视神经病变 GenSight GS010 EMA审查中 AAV2 03AAV在血液疾病的临床研究Sangamo、Spark、uniQure公司关于血友病的临床进展均比较顺利，已经进入3期。2021年5月17日， NMPA受理了信致医药科技申报的AAV基因治疗B型血友病BBM-H901的临床试验申请。这是继纽福斯之后，国内申报临床的又一款AAV基因治疗。适应症 公司 药物名称 临床分期 载体选择 镰状细胞贫血病 CRISPR CTX001 2期 CRISPR/Cas9 β地中海贫血病 CRISPR CYX001 2期 CRISPR/Cas9 血友病A Sangamo SB-525 3期 AAV6 Spark SPK-8011 3期 AAV-Spark200 血友病B Spark SPK-9001 3期 AAV-Spark100 uniQure AMT-061 3期 AAV5-FⅨ-Padua 04AAV在其它遗传类疾病的临床研究适应症 公司 药物名称 临床分期 载体选择 脂蛋白酯酶缺乏症 uniQure Glybera 2014年上市2017年退市 AAV1-LPL 脊髓型及萎缩症 诺华 Zolgensma 2019年上市 AAV 法布里病 4D Molecular 4D-310 1期 AAV Sangamo ST-920 1/2期 AAV6 X连锁肌小管性肌病 astellas AT132 clinical Gene replacement 庞贝病 astellas AT845 clinical Gene replacement Spark SPK-3006 1/2期 AAV 杜氏肌营养不良症 辉瑞 PF-06939926 3期 AAV9 Solid Biosciences SGT-001 1/2期 AAV-SLB101 克拉伯病 Passage Bio PBKR03 1/2期 AAVhu68-GALC 达农病 Rocket Pharma RP-A501 1/2期 AAV9-LAMP2B 威尔逊病 Vivet VTX-801 1/2期 rAAV-ATP7B 神经节苷脂贮积症 Passage Bio PBGM01 1/2期 AAVhu68-GALC 二型粘多糖沉积病 Regenxbio RGX-121 1/2期 AAV9-IDS 一型粘多糖沉积病 Regenxbio RGX-111 1/2期 AAV9-IDUA 糖原贮积病1a型 Ultragenyx DTX 401 1/2期 AAV 鸟氨酸转氨酶缺乏症 Ultragenyx DTX 301 1/2期 AAV-OTC 血清型的选择及启动子的选择是实验从始至终都要考虑的关键因素，临床研究中需要考虑到由于中和抗体作用导致治疗无效的免疫障碍，因此对于血清型的选择更加困难和复杂，为了提高靶向性，组织特异性启动子的使用也是一个趋势。而作为临床前阶段研究，载体及选择更为后续的临床研究打下坚实基础，那么如何在体内实验中选择AAV的血清型及启动子，如何开展有效体内实验及选择正确的检测方法，欢迎大家参加我们与abcam合作的讲座得到解答。参考资料：1. Kuzmin D A , Shutova M V , Johnston N R , et al. The clinical landscape for AAV gene therapies[J]. Nature Reviews Drug Discovery, 2021, 20(3).2. https://clinicaltrials.gov
（责任编辑：dawenwu）
从基因治疗临床研究，聚焦AAV的靶向性及临床前科研趋势
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