基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定阳性培养瓶细菌的新进展

此文是曲芬教授的《基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定阳性培养瓶细菌的新进展》，目前质谱仪用于鉴定临床微生物较普遍，而针对临床败血症病例的发病率和死亡率高的严重性，迫切需要不断优化流程进而提高诊断速度，为严重败血症的早期救治提供支持。近年来，不断探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF）快速鉴定阳性培养瓶细菌的效果，以期进一步缩短报告时间。下面就让金宝带大家了解一下这项研究新进展吧。曲芬，解放军第三〇二医院临床检验医学中心主任医师，教授，北京大学医学部、解放军医学院及河北北方学院的硕士研究生导师，公派法国地中海大学访问学者。现任解放军第十届医学科学技术委员会检验医学委员；中国药学会抗生素专业委员会委员；中国研究型医院学会检验医学专业委员会委员；全国卫生产业企业管理协会实验医学专家委员会委员；中国医师协会检验分会精准检测和诊断专业委员会委员；华人药敏委员会（ChiCAST）学术顾问；中国合格评定中心医学实验室主任评审员。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)是应用于细菌全细胞快速检测的一项技术，与传统微生物鉴定技术比较体现了鉴定范围广、鉴定速度快、灵敏度高、成本低的优越性。近年来，临床血流感染的败血症病例的发生率和死亡率持续升高，研究显示随着开始治疗时间的延后，生存率直线下降，半小时以内用药的生存率达80%以上，而36小时以后用药生存率不到5%。因此迫切需要不断优化流程而提高诊断速度，为严重败血症的早期救治提供支持。研究证明阳性血培养样本的直接MALDI-TOF-MS检测与培养纯菌落的检测至少节省18-24小时，而处理阳性血培养液的核心是需要去除细胞和杂质蛋白，其中洗涤菌体是降低培养基成分影响的有效途径。研究者们为此做出了大量的努力，Lin JF等首先证实阳性血培养的标本的原液只有经裂解后进行MALDI-TOF-MS检测有清晰的质谱信号，并可适当降cut-off值；Fothergill A等用直接过滤法处理阳性培养瓶的培养液，该方法优点是不需要离心，整个过程15分钟内完成，国内的陈峰等用分离胶促凝管处理血培养瓶的质谱鉴定，是一种快速、简便、成本低、易推广的方法，实际应用更多的是裂解法，包括皂甙裂解及SDS裂解法；德国的奥尔登堡大学医院卫生研究所把阳性培养瓶快速孵育后质谱检测并报告给临床作为常规程序，进一步评估对临床的指导作用，快速孵育的质谱鉴定可直接指导临床72.2%的患者更改治疗方案，真正改善临床效果；Jette S.Jung等报道了质谱半定量阳性瓶细菌的敏感性，体现了对临床抗感染治疗的重要指导作用。在金宝看来，MALDI-TOF在临床微生物快速诊断方面的优越性在不断提高，其开发潜力也在不断被挖掘，成为提高临床救治成功率的有力工具。不同的研究方法、前处理鉴定效果及作用不同，需要我们在实际工作中不断积累、不断总结、不断完善。  -End-    
（责任编辑：dawenwu）