电泳达人候选:DNA胶回收电泳的上样技巧

凝胶电泳,虽是一项看似不起眼的技术,却也蕴藏着不少学问。如果你总结出了一些电泳技巧和经验,或者对核酸电泳/蛋白电泳有一些特别的心得体会,那么你就是我们要寻找的“电泳达人”啦。欢迎参加生物通举办的“电泳达人”评选活动。
北京工业大学生命科学与生物工程学院的刘斌为我们介绍了DNA胶回收电泳的上样技巧。
 
 
DNA胶回收电泳时通常选择跑大孔的琼脂糖凝胶。对于大孔的琼脂糖凝胶,电泳之后的待回收DNA条带通常分布面积较大,弥散且不够清晰,给后续的切胶和回收带来不便。尝试用小孔加样方式对待回收DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,取得了不错的效果。
选择两种不同长度的待回收DNA样品(约800 bp和1700 bp),分别用小孔和大孔琼脂糖凝胶(浓度均为1.5 %)进行电泳。每种待回收的DNA样品体积均为50 μl,对于小孔琼脂糖凝胶电泳,将待回收的DNA样品加样于相邻的5个小加样孔中,每孔加样10 μl;对于大孔琼脂糖凝胶电泳,直接将50 μl待回收的DNA样品加样于大加样孔中。电泳结果如下图所示。
 
图1  DNA样品胶回收的比较(约800 bp)(1)小孔琼脂糖凝胶;(2)大孔琼脂糖凝胶。
  
 
图2  DNA样品胶回收的比较(约1700 bp)(1)小孔琼脂糖凝胶;(2)大孔琼脂糖凝胶。
图中被白色方框框出的条带即为待回收的DNA。从图中可以看出,与大孔琼脂糖凝胶相比,小孔琼脂糖凝胶中的目的DNA条带更为清晰、锐利,有利于切胶操作及后续的胶收回过程。
如果您也有类似的经验,欢迎积极参加。北京百晶生物技术有限公司为这次活动赞助了丰富的礼品。
(责任编辑:labweb)

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