细胞内肿瘤标志物microRNA的精准测定

上转换纳米颗粒(UCNP)荧光材料,因其比可见光更深的穿透深度和较好的生物相容性,被广泛应用于生物传感和医学影响等领域。江南大学匡华教授研究团队利用UCNP与金纳米粒子为基元通过核酸杂交进行组装,制备了手性金字塔结构并成功应用于活细胞内的microRNA精准测定。

 

 

文献来源:Dual-Mode Ultrasensitive Quantification of MicroRNA in Living Cells by Chiroplasmonic Nanopyramids Self-Assembled from Gold and Upconversion Nanoparticles.

 

microRNA在肿瘤细胞内高表达,通过定量监测细胞内microRNA的水平,可以有效区分癌细胞和正常细胞。组装体中等离子基元对UCNP荧光团产生较强的淬灭效应,荧光信号极其微弱,然而,该异质三维结构对右圆偏振光具有特异性吸收,在520nm下呈现强烈的圆二色光谱(CD)吸收光谱。

 

此手性金字塔结构细胞相容性好,能以完整形态进入细胞内。课题组通过精确设计核酸序列,使得三维构象骨架核酸可以特异性地与microRNA 21 发生亲和识别反应。

 

金字塔探针与细胞内的microRNA发生识别反应后,导致结构离散,在此过程中,特异性的等离子手性信号逐渐减弱而上转换发光信号逐渐增强,通过监测CD响应和荧光响应,实现了细胞内microRNA的定量分析。UCNP荧光信号与细胞内microRNA 21含量呈线性正相关,最低检测限可达0.12 fmol/10µg RNA;CD信号与细胞内microRNA 21含量呈线性负相关,检测限可达0.03 fmol/10µg RNA,为目前报道的最灵敏的胞内原位定量分析方法。

 

研究成果发表于《J. Am. Chem. Soc.》,并被ACS Cutting-Edge Chemistry专栏进行了推介和点评。

(责任编辑:sgx)

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