调节瞬时转染基因的表达 *四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物 阶段一:pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞 培养和转染细胞 1. 在DMEM完全培养液中培养贴壁细胞。转…
基因技术可给人类巨大的利益,但也给医学、伦理、法律和经济带来巨大冲击。基因检验滥用造成了资源浪费及不必要的医疗纠纷,基因隐私导致用人和保险歧视,但限制基因检验又对基因检验技术的发展…
生化方法 * 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 1.转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养…
原核细胞 *用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建 1.PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段,片段5’端和3’端带有与IPTG诱…
1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。 2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。…